ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。在檢測時,受檢標本(測定其中的抗原)與固相載體表面的抗體反應。洗滌后加入酶標記的抗體,通過反應結合在固相載體上。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)在生物實驗技術中,ELISA是一種非常常見的分析方法。其原理是抗原或抗體的固相化及抗原抗體的酶標記。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,由此進行定性或定量分析。該實驗因其靈敏度較高,特異性較好,操作較簡單,可大批量操作而廣泛應用于多種傳染性疾病的篩查工作中。而在進行ELISA實驗的過程中,有時會遇到一種被稱為“花板”的現(xiàn)象。
“花板”現(xiàn)象,顧名思義,是指在進行ELISA實驗時,酶標板上的反應孔出現(xiàn)了不均勻的顏色分布,使得孔內(nèi)的顏色看起來像是“花”一樣。所謂“花板”,就是空白、陰性、陽性對照及室內(nèi)質(zhì)控孔結果正常,而標本孔的OD值卻偏高,弱陽性結果較多。這一現(xiàn)象的出現(xiàn),影響了實驗結果的準確性,往往是由于實驗過程中的某些操作不當或試劑的問題所導致的。對“花板”現(xiàn)象進行了分析和總結,認為花板原因大多在樣品,解決辦法主要在洗滌,孵育和顯色過程也會導致。
免疫熒光試驗(immunofluorescence test)一種免疫標記技術。用于檢測相應抗原或抗體。即用熒光素與抗體連接成熒光抗體,再與待檢標本中的抗原反應,置熒光顯微鏡下觀察,抗原抗體復合物散發(fā)出熒光,借此對標本中的抗原進行鑒定或定位。